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Consejos para preservar tejidos

La decisión de utilizar un preservativo o un fijador en su tejido dependerá mucho de los métodos para seccionar y el proceso que usted utilizará, de los datos que usted desea recoger en última instancia, el tiempo deseado de almacenamiento, y en la calidad, edad y características inherentes de su tejido. Como con muchas técnicas experimentales, es necesario darse un plazo para optimizar su protocolo en sus tejidos.

El etanol es un fijador muy bueno, cuando se utiliza en diluido en varias proporciones con agua. Las diluciones que incluyen menos de 50/50 ethanol/agua introducen la posibilidad de crecimiento de patógenos en el tejido. Esto es una posibilidad incluso almacenando por corto tiempo las muestras, si el porcentaje del etanol es bajo. Sin embargo, esto es aceptable si el tejido debe seccionarse en un plazo de 7 días; en tal caso, se recomienda la refrigeración del tejido en el fijador. Las proporciones de etanol de más del de 75% introducen el peligro de hacer el tejido duro o de textura gomosa, lo que puede hacer muy difícil de conseguir secciones finas a mano. Estas proporciones son aceptables si el tejido va a seccionarse en 2 a 4 semanas

Como todo alcohol, el etanol tiende a deshidratar y contraer el tejido en cierto grado. Esto puede evitarse agregando una cantidad pequeña de ácido acético glacial (~ el 5% del volumen total). El clásico fijador FAA de tejido vegetal (Formaldehído Alcohol Acido acético 10%:50%:5% + 35% agua) puede ser usado exitosamente. Las ventajas incluyen la penetración rápida y completa del tejido por el formaldehído, la posibilidades de almacenamiento prolongado, y un equilibrio de la contracción/expansión producidas por el alcohol y el ácido Además, el formaldehído es un fijador de no-coagulación que une químicamente componentes celulares, teniendo en cuenta la preservación de la estructura. Las desventajas incluyen la toxicidad del formaldehído.

Para información adicional, los investigadores pueden consultar el excelente texto de Steven E. Ruzin. (Plant Microtechnique and Microscopy, ISBN: 13 978-0-19-508956-1)